Nový koronavírus (SARS-COV-2) multiplexná súprava PCR v reálnom čase
Táto vysoko citlivá súprava PCR pripravená na použitie je k dispozícii v lyofilizovanom formáte (proces zmrazenia sušenia) pre dlhodobé úložisko. Súprava je možné prepravovať a skladovať pri izbovej teplote a je stabilná na jeden rok. Každá trubica premixu obsahuje všetky činidlá potrebné na amplifikáciu PCR, vrátane reverznej transcriptázy, TAQ polymerázy, primérov, sond a substrátov DNTPS. Potrebuje iba pridať 13 -ročnú destilovanú vodu a 5UL extrahovanú templát RNA, potom sa môže spustiť a zosilniť na prístrojoch PCR.
Stroj QPCR by mal spĺňať nasledujúce požiadavky:
1. ZARIADENIE 8 Strip PCR Objem trubice 0,2 ml
2. Majte viac ako štyri detekčné kanály:
Kanál | Excitácia (NM) | Emisie (NM) | Vopred kalibrované farbivá |
1. | 470 | 525 | Fam, Sybr Green I |
2 | 523 | 564 | Vic, Hex, Tet, Joe |
3. | 571 | 621 | Rox, Texas-Red |
4 | 630 | 670 | Cy5 |
PCR-platformy:
7500Real-time PCR System, Biorad CF96, Icycler IQ ™ v reálnom čase PCR detekčný systém, Stratagene MX3000P, MX3005P
Obtiažnosť transportu chladného reťazca nového činidla detekcie nukleových kyselín koronavírus
Ak sa konvenčné činidlá detekcie nukleových kyselín prepravujú na dlhú vzdialenosť, je potrebné skladovanie a transport chladného reťazca a prepravu chladného reťazca, aby sa zabezpečilo, že bioaktívny enzým v činidlách zostane aktívny. Aby sa zabezpečilo, že teplota dosiahne štandard, je potrebných niekoľko kilogramov suchého ľadu pre každú škatuľu činidla na testovanie nukleových kyselín ešte menej ako 50 g, ale môže trvať iba dva alebo tri dni. Z hľadiska priemyselnej praxe je skutočná váha činidiel vydaných výrobcami nižšia ako 10% (alebo oveľa nižšia ako táto hodnota) kontajnera. Väčšina hmotnosti pochádza zo suchého ľadu, ľadových balíčkov a penových škatúľ, takže náklady na prepravu sú mimoriadne vysoké.
V marci 2020 sa Covid-19 začal vypuknúť vo veľkom rozsahu v zahraničí a dopyt po novom činidle detekcie nukleových kyselín koronavírusov sa dramaticky zvýšil. Napriek vysokým nákladom na vývoz činidiel v chladnom reťazci ho väčšina výrobcov môže stále akceptovať z dôvodu veľkého množstva a vysokého zisku.
Avšak so zlepšením národných vývozných politík pre antipandemické výrobky, ako aj s modernizáciou vnútroštátnej kontroly nad tokom ľudí a logistiky, existuje rozšírenie a neistota v dobe dopravy reagencií, čo viedlo k spôsobeným výrazným problémom s výrobkami prepravou. Rozšírený čas prepravy (čas prepravy asi pol mesiaca je veľmi bežný) vedie k častým zlyhaniam produktu, keď produkt dosiahne klienta. To znepokojilo väčšinu činidiel nukleových kyselín, ktoré vyvážajú podniky.
Lyofilizovaná technológia pre činidlo PCR pomohla prepravu nových činidiel detekcie nukleových kyselín koronavírusov na celom svete
Lyofilizované reagencie PCR sa môžu prepravovať a skladovať pri izbovej teplote, čo môže nielen znížiť náklady na prepravu, ale tiež sa vyhnúť problémom s kvalitou spôsobenými prepravným procesom. Preto je lyofilizácia činidla najlepším spôsobom, ako vyriešiť problém vývoznej prepravy.
Lyofilizácia zahŕňa zmrazenie roztoku do tuhého stavu a potom sublimuje a oddeľuje vodnú paru vo vákuovom stave. Sušená rozpustená látka zostáva v nádobe s rovnakým zložením a aktivitou. V porovnaní s konvenčnými kvapalnými činidlami má plne komponent lyofilizované nové činidlá detekcie nukleových kyselín koronavírusom produkované obmedzením Bio nasledujúce vlastnosti:
Mimoriadne silná stabilita tepla:Môže s ošetrením stojanom 56 ℃ po dobu 60 dní a morfológia a výkon činidla zostávajú nezmenené.
Normálne skladovanie a preprava teploty:Nie je potrebné chladný reťazec, nie je potrebné ukladať pri nízkej teplote pred odhalením, úplne uvoľnite priestor na úložisko.
Pripravené na použitie:Lyofilizácia všetkých komponentov, nie je potrebné konfiguráciu systému, vyhnúť sa strate komponentov s vysokou viskozitou, ako je enzým.
Multiplexné ciele v jednej trubici:Detekčný cieľ pokrýva nový gén Coronavirus ORF1AB, N gén, gén S, aby sa zabránilo genovariácii vírusu. Aby sa znížila falošne negatívna, ľudský gén RNázy P sa používa ako vnútorná kontrola, aby sa uspokojila klinická potreba kontroly kvality vzorky.