Rýchly test fetálneho fibronektínu
PLÁNOVANÉ POUŽITIE
StrongStep®PROM test je vizuálne interpretovaný imunochromatografický test určený na kvalitatívnu detekciu fetálneho fibronektínu v cervikovaginálnom sekréte.Prítomnosť fetálneho fibronektínu v cervikovaginálnom sekréte medzi 22. týždňom, 0. dňom a 34. týždňom, 6. dňom tehotenstva jespojené so zvýšeným rizikom predčasného pôrodu.
ÚVOD
Predčasný pôrod, definovaný Americkou akadémiou pôrodníkov a gynekológov ako pôrod pred 37. týždňom tehotenstva, je zodpovedný za väčšinu nechromozomálnej perinatálnej morbidity a mortality.Príznaky hroziaceho predčasného pôrodu zahŕňajú kontrakcie maternice, zmenu vaginálneho výtoku, vaginálne krvácanie, bolesti chrbta, abdominálny diskomfort, tlak v panve a kŕče.Diagnostické modality na identifikáciu hroziaceho predčasného pôrodu zahŕňajú sledovanie aktivity maternice a digitálne vyšetrenie krčka maternice, ktoré umožňuje odhadnúť rozmery krčka maternice.Ukázalo sa, že tieto metódy sú obmedzené, pretože minimálna dilatácia krčka maternice (< 3 centimetre) a aktivita maternice sa vyskytujú normálne a nie sú nevyhnutne diagnostikou hroziaceho predčasného pôrodu.Zatiaľ čo bolo hodnotených niekoľko sérových biochemických markerov, žiadny nebol široko akceptovaný na praktické klinické použitie.
Fetálny fibronektín (fFN), izoforma fibronektínu, je komplexný adhezívny glykoproteín s molekulovou hmotnosťou približne 500 000 daltonov.Matsuura a spolupracovníci opísali monoklonálnu protilátku nazývanú FDC-6, ktorá špecificky rozpoznáva III-CS, oblasť definujúcu fetálnu izoformu fibronektínu.Imunohistochemické štúdie placenty ukázali, že fFN jeobmedzené na extracelulárnu matricu oblasti definujúcej spojeniematerských a fetálnych jednotiek v maternici.
Fetálny fibronektín možno detegovať v cervikovaginálnom sekréte žien počas tehotenstva pomocou imunotestu na báze monoklonálnych protilátok.Fetálny fibronektín je zvýšený v cervikovaginálnych sekrétoch počas skorého tehotenstva, ale je znížený od 22 do 35 týždňov u normálnych tehotenstiev.Význam jeho prítomnosti vo vagíne počas prvých týždňov tehotenstva nie je známy.Môže však jednoducho odrážať normálny rast extravilóznej populácie trofoblastov a placenty.Detekcia fFN v cervikovaginálnom sekréte medzi 22. týždňom, 0. dňom a 34. týždňom, 6. deň tehotenstva sa uvádza ako spojená s predčasným pôrodom u symptomatických a medzi 22. týždňom, 0. dňom a 30. týždňom, 6. dňom u asymptomatických tehotných žien.
PRINCÍP
StrongStep®fFN Test využíva farebnú imunochromatografiu, technológiu kapilárneho toku.Postup testu vyžaduje solubilizáciu fFN z vaginálneho tampónu zmiešaním tampónu so vzorkovým pufrom.Potom sa zmiešaný vzorkový pufor pridá do jamky na vzorku testovacej kazety a zmes migruje pozdĺž povrchu membrány.Ak je vo vzorke prítomný fFN, vytvorí komplex s primárnou anti-fFN protilátkou konjugovanou s farebnými časticami.Komplex bude potom viazaný druhou anti-fFN protilátkou potiahnutou na nitrocelulózovej membráne.Vzhľad viditeľnej testovacej čiary spolu s kontrolnou čiarou bude znamenať pozitívny výsledok.
KOMPONENTY SÚPRAVY
| 20 Individuálne packed testovacie zariadenia | Každé zariadenie obsahuje prúžok s farebnými konjugátmi a reaktívnymi činidlami vopred potiahnutými v zodpovedajúcich oblastiach. |
| 2ExtrakciaNádobka s pufrom | 0,1 M fosfátom pufrovaný fyziologický roztok (PBS) a 0,02 % azid sodný. |
| 1 Pozitívny kontrolný tampón (iba na požiadanie) | Obsahuje fFN a azid sodný.Pre externé ovládanie. |
| 1 Negatívny kontrolný tampón (iba na požiadanie) | Neobsahuje fFN.Pre externú kontrolu. |
| 20 Extrakčné rúrky | Použitie na prípravu vzoriek. |
| 1 Pracovná stanica | Miesto na držanie ampuliek a skúmaviek s pufrom. |
| 1 Príbalový leták | Pre návod na obsluhu. |
MATERIÁLY POTREBNÉ, ALE NIE SÚ DODÁVANÉ
| Časovač | Na načasovanie. |
OPATRENIA
■ Len na profesionálne diagnostické použitie in vitro.
■ Nepoužívajte po dátume exspirácie uvedenom na obale.Test nepoužívajte, ak je fóliové vrecko poškodené.Testy nepoužívajte opakovane.
■ Táto súprava obsahuje produkty živočíšneho pôvodu.Overená znalosť pôvodu a/alebo sanitárneho stavu zvierat úplne nezaručuje neprítomnosť prenosných patogénov.Preto sa odporúča, aby sa s týmito výrobkami zaobchádzalo ako s potenciálne infekčnými a manipulovalo sa s nimi v súlade s bežnými bezpečnostnými opatreniami (neprehĺtajte ani nevdychujte).
■ Zabráňte krížovej kontaminácii vzoriek použitím novej zbernej nádoby na vzorky pre každú získanú vzorku.
■ Pred vykonaním akýchkoľvek testov si pozorne prečítajte celý postup.
■ V oblasti, kde sa manipuluje so vzorkami a súpravami, nejedzte, nepite ani nefajčite.So všetkými vzorkami zaobchádzajte tak, ako keby obsahovali infekčné agens.Počas celého postupu dodržiavajte zavedené opatrenia proti mikrobiologickým rizikám a dodržiavajte štandardné postupy na správnu likvidáciu vzoriek.Pri testovaní vzoriek noste ochranný odev, ako sú laboratórne plášte, jednorazové rukavice a ochranu očí.
■ Nezamieňajte ani nemiešajte činidlá z rôznych šarží.Nemiešajte uzávery fliaš s roztokom.
■ Vlhkosť a teplota môžu nepriaznivo ovplyvniť výsledky.
■ Po dokončení testu tampóny opatrne zlikvidujte po ich autoklávovaní pri teplote 121 °C po dobu najmenej 20 minút.Alternatívne môžu byť ošetrené 0,5 % chlórnanom sodným (alebo domácim bieliacim prostriedkom) jednu hodinu pred likvidáciou.Použité testovacie materiály by sa mali zlikvidovať v súlade s miestnymi, štátnymi a/alebo federálnymi predpismi.
■ Cytologické kefky nepoužívajte u tehotných pacientok.
SKLADOVANIE A STABILITA
■ Súprava by sa mala uchovávať pri teplote 2-30 °C do dátumu exspirácie vytlačeného na zapečatenom vrecku.
■ Test musí zostať až do použitia v zapečatenom vrecku.
■ Neuchovávajte v mrazničke.
■ Je potrebné dbať na ochranu komponentov tejto súpravy pred kontamináciou.Nepoužívajte, ak existuje dôkaz o mikrobiálnej kontaminácii alebo zrážaní.Biologická kontaminácia dávkovacích zariadení, nádob alebo činidiel môže viesť k nesprávnym výsledkom.
ODBER A SKLADOVANIE VZORIEK
■ Používajte iba sterilné tampóny so špičkou Dacron alebo Rayon s plastovými driekmi.Odporúča sa použiť tampóny dodávané výrobcom súpravy (tabuľky nie sú súčasťou tejto súpravy, informácie o objednávke vám poskytne výrobca alebo miestny distribútor, katalógové číslo je 207000).Výtery od iných dodávateľov neboli validované.Neodporúča sa používať tampóny s bavlnenými hrotmi alebo drevenými driekmi.
■ Cervikovaginálny sekrét sa získava zo zadného fornixu vagíny.Proces zberu má byť šetrný.Rázny alebo násilný odber, bežný pre mikrobiologické kultúry, sa nevyžaduje.Počas vyšetrenia zrkadla, pred akýmkoľvek vyšetrením alebo manipuláciou s cervixom alebo vaginálnym traktom, zľahka otáčajte hrotom aplikátora cez zadný fornix vagíny približne na 10 sekúnd, aby sa absorboval cervikovaginálny sekrét.Následné pokusy o nasýtenie hrotu aplikátora môžu test znehodnotiť.Odstráňte aplikátor a vykonajte test podľa pokynov nižšie.
■ Vložte tampón do extrakčnej skúmavky, ak je možné test spustiť ihneď.Ak nie je možné okamžité testovanie, vzorky pacientov by sa mali umiestniť do suchej transportnej skúmavky na uskladnenie alebo prepravu.Tampóny sa môžu uchovávať 24 hodín pri izbovej teplote (15-30°C) alebo 1 týždeň pri 4°C alebo nie dlhšie ako 6 mesiacov pri -20°C.Všetky vzorky by sa mali pred testovaním nechať vytemperovať na izbovú teplotu 15-30°C.
POSTUP
Testy, vzorky, pufor a/alebo kontroly pred použitím vytemperujte na izbovú teplotu (15-30°C).
■ Umiestnite čistú extrakčnú trubicu na určené miesto na pracovnej stanici.Pridajte 1 ml extrakčného pufra do extrakčnej skúmavky.
■ Vložte tampón na vzorku do skúmavky.Roztok energicky premiešajte tak, že tampón silno otáčate proti stene skúmavky aspoň desaťkrát (pri ponorení).Najlepšie výsledky sa dosiahnu, keď sa vzorka v roztoku energicky premieša.
■ Pri vyberaní tampónu vytlačte z tampónu čo najviac tekutiny tak, že stlačíte stranu pružnej extrakčnej hadičky.Aspoň 1/2 tlmivého roztoku na vzorku musí zostať v skúmavke, aby došlo k adekvátnej kapilárnej migrácii.Nasaďte uzáver na extrahovanú skúmavku.
Tampón vyhoďte do vhodnej nádoby na biologický odpad.
■ Extrahované vzorky sa môžu uchovávať pri izbovej teplote 60 minút bez ovplyvnenia výsledku testu.
■ Vyberte test z jeho zapečateného vrecka a položte ho na čistý a rovný povrch.Označte zariadenie identifikáciou pacienta alebo kontroly.Aby ste dosiahli čo najlepší výsledok, test by sa mal vykonať do jednej hodiny.
■ Pridajte 3 kvapky (približne 100 µl) extrahovanej vzorky z extrakčnej skúmavky do jamky na vzorku na testovacej kazete.
Zabráňte zachytávaniu vzduchových bublín v jamke na vzorku (S) a nekvapkajte žiadny roztok do pozorovacieho okienka.
Keď test začne fungovať, uvidíte, ako sa farba pohybuje po membráne.
■ Počkajte, kým sa objavia farebné pásy.Výsledok by sa mal odčítať po 5 minútach.Neinterpretujte výsledok po 5 minútach.
Použité skúmavky a testovacie kazety vyhoďte do vhodnej nádoby na biologický odpad.
NTERPRETÁCIA VÝSLEDKOV
| POZITÍVNYVÝSLEDOK:
| Na membráne sa objavia dva farebné pásy.Jeden pás sa objaví v kontrolnej oblasti (C) a ďalší pás sa objaví v testovacej oblasti (T). |
| NEGATÍVNYVÝSLEDOK:
| V kontrolnej oblasti (C) sa objaví iba jeden farebný pás.V testovacej oblasti (T) sa neobjaví žiadny viditeľný farebný pás. |
| NEPLATNÉVÝSLEDOK:
| Kontrolný pásik sa nezobrazuje.Výsledky akéhokoľvek testu, ktorý nevytvoril kontrolný pás v špecifikovanom čase čítania, sa musia vyradiť.Skontrolujte postup a zopakujte ho s novým testom.Ak problém pretrváva, okamžite prestaňte súpravu používať a kontaktujte miestneho distribútora. |
POZNÁMKA:
1. Intenzita farby v testovacej oblasti (T) sa môže meniť v závislosti od koncentrácie cieľových látok prítomných vo vzorke.Hladinu látok však nemožno týmto kvalitatívnym testom určiť.
2. Nedostatočný objem vzorky, nesprávny operačný postup alebo vykonanie testov s uplynutou platnosťou sú najpravdepodobnejšími dôvodmi zlyhania kontrolného pásma.
KONTROLA KVALITY
■ Súčasťou testu sú interné procedurálne kontroly.Farebný pás v kontrolnej oblasti (C) sa považuje za vnútornú pozitívnu procedurálnu kontrolu.Potvrdzuje dostatočný objem vzorky a správnu techniku postupu.
■ Súpravy môžu poskytnúť externé procedurálne kontroly (iba na požiadanie), aby sa zabezpečilo, že testy fungujú správne.Ovládacie prvky môžu byť tiež použité na preukázanie správneho výkonu testovacieho operátora.Ak chcete vykonať pozitívny alebo negatívny kontrolný test, dokončite kroky v časti Postup testu a zaobchádzajte s kontrolným tampónom rovnakým spôsobom ako s tampónom zo vzorky.
OBMEDZENIA TESTU
1. Tento test možno použiť len na kvalitatívnu detekciu fetálneho fibronektínu v cervikovaginálnom sekréte.
2. Výsledky testov by sa mali vždy používať v spojení s inými klinickými a laboratórnymi údajmi pre manažment pacienta.
3. Vzorky by sa mali odoberať pred digitálnym vyšetrením alebo manipuláciou s cervixom.Manipulácie na krčku maternice môžu viesť k falošne pozitívnym výsledkom.
4. Vzorky by sa nemali odoberať, ak mal pacient pohlavný styk do 24 hodín, aby sa eliminovali falošne pozitívne výsledky.
5. Pacientky s podozrením alebo známou abrupciou placenty, placentou previa alebo stredne závažným alebo hrubým vaginálnym krvácaním by sa nemali testovať.
6. Pacienti s cerklážou by sa nemali testovať.
7. Výkonnostné charakteristiky StrongStep®fFN test je založený na štúdiách u žien s jednorazovým tehotenstvom.Výkon nebol overený u pacientok s viacnásobným tehotenstvom, napr. u dvojčiat.
8. StrongStep®Test fFN nie je určený na vykonávanie v prípade prasknutia amniotických membrán a pred vykonaním testu by sa malo prasknutie amniových membrán vylúčiť.
VÝKONOVÉ CHARAKTERISTIKY
Tabuľka: StrongStep® fFN Test verzus test fFN inej značky
| Relatívna citlivosť: 97,96 % (89,13 % – 99,95 %)* Relatívna špecifickosť: 98,73 % (95,50 % – 99,85 %)* Celková dohoda: 98,55 % (95,82 % – 99,70 %)* * 95% interval spoľahlivosti |
| Ďalšia značka |
| ||
| + | - | Celkom | |||
| StrongStep®fFn Test | + | 48 | 2 | 50 | |
| - | 1 | 156 | 157 | ||
|
| 49 | 158 | 207 | ||
Analytická citlivosť
Najnižšie detekovateľné množstvo fFN v extrahovanej vzorke je 50 μg/l.
U symptomatických žien zvýšené hladiny (≥ 0,050 μg/ml) (1 x 10-7 mmol/l) fFN medzi 24. týždňom, 0. dňom a 34. týždňom, 6. dňom naznačujú zvýšené riziko pôrodu za ≤ 7 alebo ≤ 14 dní od odber vzoriek.U asymptomatických žien zvýšené hladiny fFN medzi 22. týždňom, 0. dňom a 30. týždňom, 6. dňom naznačujú zvýšené riziko pôrodu v ≤ 34. týždni, 6. dni tehotenstva.Hranica 50 μg/l fFN bola stanovená v multicentrickej štúdii uskutočnenej na vyhodnotenie asociácie medzi expresiou fetálneho fibronektínu počas tehotenstva a predčasným pôrodom.
Rušivé látky
Je potrebné dbať na to, aby nedošlo ku kontaminácii aplikátora alebo cervikovaginálneho sekrétu lubrikantmi, mydlami, dezinfekčnými prostriedkami alebo krémami.Lubrikanty alebo krémy môžu fyzicky narúšať absorpciu vzorky na aplikátor.Mydlá alebo dezinfekčné prostriedky môžu interferovať s reakciou protilátka-antigén.
Potenciálne interferujúce látky boli testované v koncentráciách, ktoré by sa mohli primerane nachádzať v cervikovaginálnom sekréte.Nasledujúce látky nezasahovali do testu, keď sa testovali v uvedených hladinách.
| Látka | Koncentrácia | Látka | Koncentrácia |
| Ampicilín | 1,47 mg/ml | Prostaglandín F2 | a0,033 mg/ml |
| Erytromycín | 0,272 mg/ml | Prostaglandín E2 | 0,033 mg/ml |
| Moč matky 3. trimester | 5 % (obj.) | MonistatR (mikonazol) | 0,5 mg/ml |
| Oxytocín | 10 IU/ml | Indigo karmín | 0,232 mg/ml |
| terbutalín | 3,59 mg/ml | Gentamicín | 0,849 mg/ml |
| dexametazón | 2,50 mg/ml | BetadineR gél | 10 mg/ml |
| MgS04•7H20 | 1,49 mg/ml | Čistiaci prostriedok BetadineR | 10 mg/ml |
| ritodrín | 0,33 mg/ml | K-YR želé | 62,5 mg/ml |
| DermicidolR 2000 | 25,73 mg/ml |
LITERATÚRA ODKAZY
1. Americká vysoká škola pôrodníkov a gynekológov.Predčasný pôrod.Technický bulletin, číslo 133, október 1989.
2. Creasy RK, Resnick R. Materská a fetálna medicína: princípy a prax.Philadelphia: WB Saunders;1989.
3. Creasy RK, Merkatz IR.Prevencia predčasného pôrodu: klinické stanovisko.Obstet Gynecol 1990;76 (Suppl 1):2S–4S.
4. Morrison JC.Predčasný pôrod: hádanka, ktorú stojí za to vyriešiť.Obstet Gynecol 1990;76(Suppl 1):5S-12S.
5. Lockwood CJ, Senyei AE, Dische MR, Casal DC, a kol.Fetálny fibronektín v cervikálnych a vaginálnych sekrétoch ako prediktor predčasného pôrodu.New Engl J Med 1991;325:669–74.
SLOVNÍK SYMBOLOV
|
| Katalógové číslo |  | Obmedzenie teploty |
 | Prečítajte si návod na použitie |
| Kód šarže |
 | Diagnostická zdravotnícka pomôcka in vitro |  | Spotrebujte do |
 | Výrobca |  | Obsahuje dostatočné množstvo pretesty |
 | Nepoužívajte opakovane |  | Autorizovaný zástupca v Európskom spoločenstve |
 | Označenie CE podľa smernice IVD Medical Devices Directive 98/79/EC | ||
Liming Bio-Products Co., Ltd.
č. 12 Huayuan Road, Nanjing, Jiangsu, 210042 PR Čína.
Tel: (0086)25 85476723 Fax: (0086)25 85476387
E-mail:sales@limingbio.com
Webstránka: www.limingbio.com
www.stddiagnostics.com
www.stidiagnostics.com
WellKang Ltd.(www.CE-marking.eu) Tel: +44(20)79934346
29 Harley St., London WIG 9QR, UK Fax: +44(20)76811874
Zariadenie na rýchly test fetálneho fibronektínu StrongStep®
Predčasný pôrod, definovaný Americkou akadémiou pôrodníkov a gynekológov ako pôrod pred 37. týždňom tehotenstva, je zodpovedný za väčšinu nechromozomálnej perinatálnej morbidity a mortality.Príznaky hroziaceho predčasného pôrodu zahŕňajú kontrakcie maternice, zmenu vaginálneho výtoku, vaginálne krvácanie, bolesti chrbta, abdominálny diskomfort, tlak v panve a kŕče.Diagnostické modality na identifikáciu hroziaceho predčasného pôrodu zahŕňajú sledovanie aktivity maternice a digitálne vyšetrenie krčka maternice, ktoré umožňuje odhadnúť rozmery krčka maternice.
StrongStep® Fetal Fibronectin Rapid Test je vizuálne interpretovaný imunochromatografický test určený na kvalitatívnu detekciu fetálneho fibronektínu v cervikovaginálnom sekréte s nasledujúcimi charakteristikami:
Užívatelsky prívetivý:jednokrokový postup pri kvalitatívnom testovaní
rýchle:len 10 minút potrebných počas návštevy toho istého pacienta
Bez vybavenia:nemocnice alebo klinické prostredie s obmedzením zdroja môžu tento test vykonať
Doručené:izbová teplota (2℃-30℃)
